细胞贴壁粘附剂如何使用呢？

细胞贴壁粘附剂 (Cell adherent reagent, 200-500X)

一、产品描述

本产品是一种新型化合物，用之室温处理培养瓶 30 分钟，能够使原代或传代培养细胞的粘附贴壁能力显著增加，处理效果优于使用多聚赖氨酸和胶原蛋白，同时对绝大多数细胞类型均有明显效果，例如：胶原蛋白处理瓶皿对 HEK293 细胞无效，但细胞贴壁粘附剂对 HEK293 细胞有很好的效果，且能显著提高细胞转染效率。本产品无细胞毒性，不影响后续免疫荧光组化和酶学测定等实验，适用于各种原代细胞如乳鼠脑神经元、易漂浮的传代细胞如 PC12 和 HEK293 细胞，也适用于药物处理易漂浮细胞；其不仅能够明显改善细胞生长状态、增加细胞数量，还可以使细胞容易耐受洗涤、换液、药物处理造成的脱落。对于生长在处理过的瓶皿中的细胞而言，使用细胞贴壁粘附剂可使细胞的转染效率显著增加 2-5 倍。

二、用途及特征

各种原代细胞如脑神经元的贴壁培养；

易漂浮的传代细胞系如 PC12 和 HEK293 细胞；

能够防止洗涤、换液、药物处理导致的细胞漂浮脱落问题；

能够使真核细胞的转染效率增加 2-5 倍；

无细胞毒性，不影响后续免疫荧光组化和酶学测定。

三、规格

1 ml，200-500X 浓缩液，溶于过滤除菌生理盐水。

四、储存条件

常温运输，4℃保存 1 年。

五、使用步骤

使用时，将此浓缩溶液以 1:200-1:500 比例稀释于灭菌纯水或生理盐水 (0.9% NaCl) 或 PBS 缓冲液中，制备成工作溶液。注意：不同细胞对粘附剂的敏感度不同，通常粘附剂处理后的器皿培养细胞形态及生长状态均应正常，如果细胞比较敏感，选用高浓度的细胞贴壁粘附剂会使细胞过度粘着，有可能出现细胞褶皱、伪足伸出不畅或细胞移动分散不佳等现象，此时应将其进行高比例稀释，避免出现以上情况。

加入新鲜工作液使其覆盖培养瓶皿表面。室温或 37℃孵育 30 min，偶尔摇动。

弃去瓶皿中的液体。可用灭菌蒸馏水或灭菌生理盐水或 PBS 缓冲液等洗涤瓶皿一次，但也可不洗涤而尽量甩干后直接铺种细胞。经过处理的瓶皿可存放数天后使用。

甩干瓶皿即可用于铺种细胞，增加多种原代培养细胞如神经元细胞的贴壁能力。

六、补充说明

使用本品后，某些类型的细胞如果贴壁过紧，消化时可加大胰酶用量或延长消化时间。

该试剂安全，无毒性。