总铁离子含量测定试剂盒

试剂盒检测原理：

酸性条件下，铁元素从蛋白中剥离，与探针结合， 生成的物质在 593 nm 波长处有强 吸收峰， 在一定范围 内其光密度值与铁离子浓度成线性相关 。试剂盒检测范围 0.5-50uM， 测定铁离子含量。

样本适用范围：

可测定各类血清 、血浆 、细胞上清液中的铁离子含量。

操作步骤 

1. 样品准备： 取血清、血浆样本 55 uL与检测缓冲液165 uL混合均匀备用。如果血清样本浑浊，5000g离心    5min， 取澄 清部分使用。 

2. 试剂盒准备： 

  2.1 工作液配制：根据实际用量，将检测缓冲液和显色浓缩液按 19:1 比例混合均匀制备显色工作液 。 

     现用现配，当天使用。 

  2.2 标准品配制： 用标准品保护液将 10mM 标准品依次倍比稀释为 50 、25、12.5、6.25、3.125、         1.56、 0.78uM。 

3. 亚铁离子浓度测定 3.1 按下表进行配制和操作

  3.2 反应完成降至室温（约 2-3min） 后 ，上机测定，先用标准品保护液+显色工作液的空白管调零， 然    后于593nm（如无593nm，次选570、620nm）测定各管吸光度值。 

4. 数据处理 

利用铁标准品浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标制作标准曲线，并获得横纵坐标之间的函数关系式，得到标准方程 y=mx+n，然后将样本 OD 值带入方程得到检测铁离子浓度 a（umol/L），a （umol/L）*4 即为样本实际铁离子浓度（样本在处理过程中稀释了4倍）。

注意事项： 

1. 选取新鲜样本进行检测，冷冻样本不要超过一个月，解冻后样本或组织匀浆必须当天测定。

2. 若样本测得吸光度值大于标准品最高点吸光度值，需将样本稀释后再进行测定。 

3. 初次使用试剂盒时，小体积液体试剂请适当离心后使用。 

4. 本产品仅限专业人员用于科学研究， 不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。