中性红染色液使用原理！

中性红染色液使用原理！

中性红是一种弱碱性pH指示剂，变色范围在pH6.4～8.0之间(由红变黄)。分子式为C15H16N4.HCl，分子量为288.78。在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌。由于液泡在一般情况下呈酸性反应，因此，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色，在这种情况下，原生质和细胞壁一般不着色。死细胞由于原生质变性凝固，细胞液不能维持在液泡内，用中性红染色后，不产生液泡着色现象，相反，中性红的阳离子，却与带有一 定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质与细胞核染色。

细胞对中性红的摄入取决于细胞对pH梯度的维持能力，而这种能力是通过产生ATP来维持的。在生理pH条件下，中性红染料的净电荷几乎为零，从而使其能通过非离子被动扩散的方式穿透细胞膜进入细胞。溶酶体(lysosomes)中的质子梯度使溶酶体中的pH值低于细胞质，从而可以使中性红带上电荷并在溶酶体中积累。在细胞增殖加快时，细胞数量增多，可以摄入的中性红的量就会增加。在细胞受到损伤时，中性红的摄入能力会下降。经过一定时间摄入后，细胞经清洗并用裂解液裂解即可释放中性红而用于检测。这样通过测定细胞对于中性红的摄入量，就可以确定细胞的增殖或毒性情况。