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测定意义:
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2清除系统中具有重要作用。
测定原理:
H2O2在240nm下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应S-CAT活性的高低。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配制:
试剂一:液体×5瓶,4℃保存;临用前每瓶加入9.9mL双蒸水充分溶解后待用。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入2mL双蒸水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:液体×1瓶,4℃保存。
注意:试剂一现配现用。
测定步骤:
试剂名称 | 测定管 | 无基质管 | 无土管 |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 |
|
试剂一(μL) | 1000 |
| 1000 |
双蒸水(μL) |
| 1000 |
|
振荡培养 20min
试剂二(μL) | 25 | 25 | 25 |
混匀8000g,常温离心5min,取全部上清
试剂三(μL) | 120 | 120 | 120 |
混匀,用蒸馏水调零,240nm处记录各管A值。
注意:每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做一管。
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