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产品名称:尿素(Urea)检测试剂盒(二乙酰一肟微板法)
产品简介:
尿素(Urea)又称碳酰胺(carbamide),是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主要含氨终产物,也是目前含氨量最高的氮肥:尿素检测方法大致分为化学方法和酶学方法后者被认为是间接方法,先经尿素酶分解尿素为铵离子,然后根据波氏反应,检测铵离子的生成量。
尿素(Urea)检测试剂盒(二乙酰一肟比色法)检测原理是在酸性条件下加热一定时间,尿素与二乙酰缩合,生成红色二嗪(diazine),该反应被称为 Fearon 反应,颜色深浅与尿素含量旱正比,,通过分光光度比色法(酶标仪)测定 540nm 处吸光度,该试剂盒可用于检测人体,动物的血浆、血清、尿液等样品中尿素(旧称尿素氮,BUN)含量,尿液样品可直接检测,无需处理。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考):
1、准备样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于该试剂盒的测定,-20℃冻存。尿液中尿素含量较高,应先用蒸馏水作 1:50 稀释后再测。
2、配制标准品工作液:取适量的尿素标准(100mmol/L),按尿素标准(100mmol/L):尿素标准稀释液=1∶19 的比例混合,使浓度达到 5mmol/L,即为标准品工作液-尿素标准(5mmol/L); 4℃℃保存,1 周有效。
3、Urea 加样:按照表格设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的 Urea 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
4、Urea 检测:充分混匀,沸水水浴 12min,置于冷水中冷却 5min,加入至 96 孔板酶标仪检测 540nm 吸光度,以空白孔调零,读取标准孔、测定孔的吸光度,分别为 A标准、A 测定。
注意事项:
1、 二乙酰一肟比色法线性范围为 14mmol/L,如果浓度较高,需用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2、一般显色后应立即检测,否则会有轻度褪色。
3、尿液样品中一般尿素含量较高,样品需用1:50稀释,如果显色后吸光度仍超过本法的线性范围,还需将稀释尿液,再行稀释重新检测。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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