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产品简介:
血清中的无机磷(lnorganic phosphorous)主要由 H2PO 和HPO: 两种磷酸根阴离子组成,上述阴离子在在不同的 pH 环境下能快速相互转换,在 pH7.4 血清中两种磷酸根阴离子浓度比例为 1:4;在酸中毒环境下二者浓度约为 1:1;在碱中毒环境下二者浓度比例为1:9;在 pH4.5 尿液中浓度比例为 100:1。WHO 推荐的常规检测方法为比色法,我国卫生部临检中心推荐的常规方法为硫-酸-亚-铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法,亦可采用紫外分光光度法。无机磷检测试剂盒(紫外比色法)无需处理样本,利用无机磷与钼酸铵结合生成磷钼酸铵,通过紫外分光光度计检测 325~340nm 处吸光度,根据公式计算出无机磷含量该紫外法优点在于:操作简单、快速、稳定;缺点在于:易受溶血、黄疽、脂血的干扰。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考):
(选做)制备样品:
1、①血浆、血清样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于本试剂盒的测定,-20℃冻存,用于 Pi的检测。
②细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20℃冻存,用于Pi 的检测。
③高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的 Pi,可以使用 ddH,0 稀释,不宜使用普通蒸馏水稀释。
④(选做)样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的 Pi 含量。
2、制备磷标准工作液:取适量的磷标准(1mg/ml),按磷标准(1mg/ml):磷标准稀释液=1:39 的比例稀释,即获得磷标准工作液(25 μg/ml=0.807 mmol/L),4℃保存,用于 Pi的检测。
3、制备钼酸铵显色液:称取适量的钼酸铵粉末,按照钼酸铵粉末:钼酸铵稀释液(2x):去离子水=12mg:10m1:10ml的比例混合溶解,即可使用。亦可称取 120mg 钼酸铵粉末加入 100ml去离子水,充分溶解后分装成 10ml或适当规格的小份,使用时与钼酸铵稀释液(2x)等比例混合即可使用,-20℃保存,可适当延长保质期。钼酸铵显色液配制后可 4℃保存2周,如溶液变浑浊或颜色加深则应弃用。请注意,本产品提供多于实际用量的钼酸铵粉末。
4、Pi 加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡,小心混匀。如果样品中的无机磷浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置2平行管,求平均值。
5、Pi 检测:混匀,室温静置 5min,比色杯光径 1cm,分光光度计 340nm 处检测,以空白管调零,读取标准管、测定管的吸光度(即为 A标准,A测定)。
有效期: 12 个月有效。常温运输,按要求保存。
南京亿迅生物科技有限公司出品的各类生化试剂盒,产品质量稳定,价格实惠,在国内各科研院所和高校拥有良好的品誉。
该类产品有:花青素(Anthocyan)检测试剂盒,细胞铁离子检测试剂盒,尿酸(UA)检测试剂盒,D-木糖检测试剂盒等。欢迎各界用户来电或留言垂询,无论您是亲自下单,还是咨询技术问题,我们将为您真诚服务。
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