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虾碱性磷酸酶使用注意事项
Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团,因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板。
本品为虾来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。该酶作用于末端去磷酸化,无论末端为粘端,还是平端。SAP 也可以用来降解PCR 反应中的dNTP,用于后续测序和SNP分析。
来源(Source) 来自毕赤酵母,克隆有北极虾(Pandalus rorealis)的虾碱性磷酸酶基因
质量控制(Quality Control) 无核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶污染
纯度(Purity) >95%
热灭活(Thermal Inactivation) 65℃温浴5 min,活性完全不可逆丧失
活性定义(Unit definition) 在25℃条件下,30分钟能使1 μg经HindⅢ(产生5’突出末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定位为1个活力单位。
注意事项
1)1×SAP Buffer: 50mM Bis-Tris HCl (pH 6.0),1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,25℃温育。
2)热失活:65℃加热5分钟,不可逆失活。当完成去磷酸化反应后,无需纯化产物,可以直接用于后续连接反应。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4) 本产品仅作科研用途!
025-65010873
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